ПГД эмбрионов при ЭКО: цели исследования, особенности проведения генетического анализа

ПГД эмбриона при ЭКО – что это значит?

Что это такое

Предимплантационное генетическое обследование является способом обследования клеток эмбриона до переноса их в полость матки. Манипуляция не требует каких-либо усилий со стороны партнеров и осуществляется эмбриологами. Для будущих родителей, использующих методы ВРТ, разница в проведении протокола ЭКО с ПГД и без нее отсутствует.

Исследование генетических нарушений эмбриона – это манипуляция, с помощью которой специалисты могут предвидеть нарушения и прогнозировать результат переноса клеток. Данная процедура дает возможность определить, унаследует ли ребенок хромосомные патологии от родителей. Также диагностика позволяет выбрать эмбрион с определенным генетическим набором, что часто требуется при необходимости донации.

Предимплантационное обследование не представляет угрозы для будущей беременности и не способно навредить эмбриону. Сложно переоценить достоинства данной процедуры, поскольку она в разы снижает риск рождения детей с отклонениями.

Изучение генетического строения выполняется только при ЭКО. Во время естественного зачатия провести данную процедуру невозможно. Альтернативным способом обследования является пренатальная диагностика. Однако при получении негативных показателей дородового обследования паре будет предложено сделать прерывание. ПГД позволяет избежать таких проблем и при выявлении генетических нарушений у плода отказаться от его переноса.

Делать ли ПГД эмбриона

Предимплантационное обследование может быть проведено по желанию пары в протоколе экстракорпорального оплодотворения за свой счет.

Показания для выполнения ПГД:

  • рождение в прошлом ребенка, который имеет генетические отклонения;
  • наличие у родителей генетических заболеваний, которые имеют половую принадлежность;
  • возраст партнеров – женщин от 35 лет, а мужчины от 40;
  • неудачные попытки проведения ЭКО в анамнезе;
  • привычное невынашивание беременности, самопроизвольное прерывание на одинаковом сроке;
  • серьезные патологии спермы у мужчины, морфологические изменения в большинстве клеток;
  • риск резус-конфликта между матерью и будущим ребенком.

Пары, которые не могут забеременеть естественным путем, в обязательном порядке получают консультацию генетика на этапе подготовки к использованию ВРТ. Специалист при необходимости назначает анализы с целью определения кариотипа и дает индивидуальные рекомендации относительно необходимости проведения ПГД эмбриона перед переносом.

На какой день выполняют диагностику

В большинстве медицинских учреждений, специализирующихся на использовании вспомогательных репродуктивных технологий, предимплантационное обследование выполняется на 3 сутки. К этому времени количество клеток эмбриона достигает 8, что позволяет без ущерба для дальнейшего развития провести анализ. Некоторые клиники предпочитают выполнять исследование на 5 день, когда количество клеток превышает 100. Такой метод считается более точным, однако не дает достаточно времени для проведения расширенного анализа.

В зависимости от вида протокола ЭКО специалисты индивидуально выбирают сроки проведения ПГД. Если предполагается криопротокол, то лучше выполнить биопсию на 5 сутки. В этом случае перенос эмбрионов планируют не ранее следующего цикла, что позволяет получить детальную информацию о генетическом материале и выбрать самые качественные клетки. Если протокол ЭКО не предполагает витрификации эмбрионов, то стоит сделать биопсию на 3 сутки развития зародыша.

У партнеров на этапе подготовке к экстракорпоральному оплодотворению часто возникают вопросы по поводу того, сколько делается ПГД и когда следуют перенос клеток. При стандартном протоколе без криоконсервации исследование проводится в сжатые сроки. Перенос эмбриона должен быть выполнен не позднее 5 дней его развития. Если биопсию взяли на 3 сутки, то у эмбриологов остается не больше 48 часов для генетического анализа.

Техника проведения манипуляции

Для партнеров, вступивших в протокол ЭКО, методика проведения процедуры с генетическим исследованием или без него не имеет существенных отличий. На начальном этапе женщина принимает гормональные средства для стимуляции, после чего выполняется забор ооцитов с помощью пункции через влагалище. Мужчина в это время сдает сперму, необходимую для оплодотворения эмбрионов. Для повышения качества клеток рекомендуется выполнить интрацитоплазматическую инъекцию, если у мужчины недостаточно хорошие показатели семенной жидкости.

После оплодотворения яйцеклетки сперматозоидом полученный материал выращивается в специальных условиях. Для проведения биопсии берется один эмбрион и помещается в чашу. С помощью миниатюрных инструментов под контролем оптической системы выполняется повреждение его оболочки лазерным лучом. Затем пипеткой берется необходимое количество клеток – обычно 1 или 2.

На следующем этапе специалисты проводят генетическое исследование полученного материала. В это время эмбрион продолжает развиваться в искусственных условиях, напоминающих полость матки. Полученным клеткам присваиваются цифирные значения в соответствии с нумерацией эмбрионов. Поэтому любые ошибки в результатах проведенных манипуляций исключены.

Результаты анализа

По прошествии двух суток специалисты оценивают полученные результаты и сопоставляют их с развитием соответствующего эмбриона. На сегодняшний день используются 3 методики предимплантационного исследования эмбрионов. Способ проведения анализа выбирается индивидуально и зависит от исходных показаний.

В полость матки женщины переносятся только те эмбрионы, у которых в процессе обследования не было обнаружено хромосомных поломок. Если процедура выполнялась с целью рождения ребенка определенного пола, то подсаживаются соответствующие клетки. Когда ПГД делают для предотвращения резус-конфликта, осуществляется перенос клеток с нужным показателем крови. Важным моментом при выборе клеток является оценка их развития на момент получения результата исследования.

Преимущество ПГД заключается в следующем:

  • повышает вероятность успешного результата протокола;
  • снижает риск самопроизвольного прерывания беременности на ранних сроках;
  • позволяет избежать многоплодной беременности;
  • практически исключает рождение ребенка с генетическими патологиями.

Эмбриологи уверены, что лучше выполнять ПГД с последующей витрификацией клеток. Это позволяет сделать доскональный анализ. Последующий перенос выполняется в естественном цикле, что значительно снижает нагрузку на организм женщины и создает условия, максимально близкие к естественному оплодотворению.


Предимплантационная генетическая диагностика

Время чтения: мин.

Экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО ) с предимплантационной генетической диагностикой (ПГД) эмбрионов, подготовленных для подсадки — процедура, которая проводится с целью исключения наследственных болезней у плода. Данный способ используется для отбора здоровых эмбрионов, намного увеличивает шансы женщины забеременеть. Его применяют на практике многие известные клиники, занимающиеся экстракорпоральным оплодотворением. Суть методики заключается в том, что генетические болезни у зародыша определяются до его переноса в полость матки.

Преимплантационная генетическая диагностика эмбриона: общие сведения о процедуре

Преимплантационная генетическая диагностика эмбриона заключается в предварительном исследовании эмбриона, который потом будет имплантирован в матку. Мероприятие носит комплексный характер, помогает исключить наличие хромосомных аномалий у плода.

Генетическое исследование и ЭКО — взаимосвязанные процедуры, которые выполняются параллельно друг другу. Чтобы осуществить генетический анализ, медицинский специалист предварительно стимулирует женщине яичники. В результате такой работы активизируется выработка фолликулов, их количество значительно увеличивается и это помогает получить более точные результаты исследования. Риск нанесения травм эмбриону в ходе предимплантационного генетического анализа минимален (меньше 1%), потому что процедура проводится на самых ранних стадиях его развития (через несколько дней после оплодотворения).

ПГД перед проведением ЭКО представляет собой молекулярно-биологическое тестирование набора хромосом в клетках или яйцеклетках зародыша. Генетическое исследование зародыша помогает врачам:

  • выявить более 150 наследственных болезней;
  • свести к минимуму риски рождения малыша с патологиями;
  • повысить эффективность лечения бесплодия.

К особенностям процедуры можно отнести следующие факторы:

  • сокращение частоты невынашивания плода;
  • сохранение вероятности ложного результата тестирования (по сути, эмбрион здоров, однако генетический анализ демонстрирует признаки отклонения, или, наоборот, у зародыша есть генетические патологии, но в анализе их не видно), погрешность достигает 10-15%;
  • не существует точных доказательств того, что скрининг увеличивает вероятность наступления беременности.

Проведение ПГД никоим образом не нарушает протокол лечения женщины в рамках ЭКО . Все исследовательские манипуляции осуществляются в лаборатории. Единственный нюанс — экстракорпоральное оплодотворение, совмещённое с генетическим анализом, требует большего количества эмбрионов. Чтобы их получить, специалисту приходится стимулировать яичники пациентки более активно.

Современный генетический скрининг эмбриона помогает выявить не только ранние пороки развития плода, но и обнаружить особые гены, которые провоцируют развитие опухолевых новообразований в груди, кишечнике, яичниках и других органах взрослого человека.

Женщина, которая планирует делать ЭКО , может являться носителем геномных заболеваний. В этом случае врач проводит генетический анализ биполярных телец её яйцеклетки до оплодотворения. Данный способ является отличной альтернативой ранней пренатальной диагностике. Он помогает уберечься от прерываний беременности вследствие обнаружения у плода отклонений генетического характера.

Генетический анализ эмбриона при ЭКО даёт больше возможностей для определения пола будущего ребёнка во время скрининга. Специалисты используют эту информацию для предупреждения развития аномалий плода, связанных с его половой принадлежностью.

В целом методика генетического анализа зародышей перед искусственным оплодотворением яйцеклетки имеет право на существование. Правда, на практике оказывается, что она не совершенна.

Генетика эмбрионов при ЭКО : история возникновения

Метод предимплантационного диагностирования генетических патологий предполагает обнаружение отклонений развития, наследуемых зародышем по генетическому признаку, от родителей. Следует заметить, что у малыша не всегда проявляются симптомы генетических дефектов и мутаций, если его родители (или один из них) являются носителями плохих генов. Здесь всё зависит от их комбинации у крохи. Ребёнок может унаследовать от мамы и папы или рецессивный, или доминантный признак патологии. Например, если крохе передался доминантный ген, который преобладает над неизменённым, то риск проявления генетического заболевания достигает 50%. Если оба родителя являются носителями рецессивного гена, клинические симптомы генетической патологии у их малыша проявятся только при унаследовании сразу 2-х рецессивных генов. Определить комбинацию генетического материала, переданного от родителей зародышу, помогает генетика эмбрионов при ЭКО.

Идея выполнения предимплантационной генетической диагностики впервые возникла задолго до появления на свет первого малыша, зачатого искусственным путём. Работа над совершенствованием методики предварительного генетического исследования сформированных зародышей имеет следующие вехи.

  • 1967 год — учёные Р. Гарднер и Р. Эдвардс публикуют научную статью о выполнении биопсии зародышей кролика, которая помогла определить пол до их помещения в матку. В своей публикации исследователи говорят, что подобные процедуры в будущем можно проводить и для человека.
  • 1990-е годы. Появляется возможность проведения ПГД для людей. Процедура экстракорпорального оплодотворения достигла высокого технологического уровня, стала более совершенной. Успешно выполнена разработка полимеразной цепной реакции (ПЦР), благодаря чему стало возможным проведение анализов ДНК отдельных клеток живого организма.
  • 1989 год — предприняты успешные попытки определения пола у человеческого зародыша посредством ПЦР-анализа дробящихся клеток (бластомеров) эмбриона.
  • 1990 год — супружеские пары, имеющие риск генетических патологий по рецессивной, Х-сцепленной болезни, успешно прошли процедуру определения пола с применением технологии ПЦР-анализа, и после неё родили здоровых малышей.
  • 1990 год — впервые проведена диагностика моногенной патологии до оплодотворения яйцеклетки. В работе использовался метод ПЦР-анализа полярных телец из яйцеклетки.
  • 1992 год — на свет появился малыш, который, находясь в эмбриональном состоянии, прошёл процедуру ПЦД с диагностированием моногенной патологии (муковисцидоза).

Позже система предимплантационной генетической диагностики была усовершенствована. Для выявления хромосомных аномалий плода и пола зародыша стали использовать методику флуоресцентной гибридизации (FISH). В 2012 году метод FISH был признан устаревшим. Его постепенно вытесняет технология сравнительной геномной гибридизации. Но следует заметить, что полимеразная цепная реакция всё равно осталась основным способом определения моногенных болезней у зародышей, подготовленных к имплантации.

Цели проведения генетики эмбрионов при ЭКО

Генетический анализ при ЭКО проводится для достижения определённых целей.

  1. Сократить риск зачатия младенца с генетическими отклонениями у родителей, которые являются носителями некачественного генетического материала.
  2. Убрать эмбрионы, которые имеют генетическую предрасположенность к неизлечимым или плохо поддающимся терапии заболеваниям.
  3. Убрать зародыши, у которых обнаружены аномалии кариотипа.
  4. Определить резус-фактор эмбриона, чтобы появилась возможность исключить риски развития гемолитических патологий у младенца.
  5. Выяснить половую принадлежность будущего ребёнка и пресечь наследование генетических болезней, сцепленных с полом.
  6. Выяснить причины, по которым предыдущие попытки сделать ЭКО оказались безуспешными, а имплантация эмбриона не произошла.
  7. Выполнить процедуру HLA-типирования, которая поможет выбрать эмбрион для зачатия ребёнка-донора. Этот способ используют, если у родителей есть больной малыш, которому необходим донорский орган. По сути, зачатый посредством ЭКО младенец становится спасителем для своего брата или сестры.

Генетическое исследование сформированных эмбрионов способствует выявлению множества наследственных заболеваний. Например, ПГД моногенных патологий помогает обнаружить:

  • болезнь Тея-Сакса;
  • муковисцидоз;
  • миодистрофию Дюшенна;
  • гемофилию типа А;
  • серповидно-клеточную анемию.
  • трисомия 21-й хромосомы (провоцирует развитие синдрома Дауна у плода);
  • патологии 18-й хромосомы (развитие синдрома Эдвардса);
  • патологии 16-й, 17-й, 18-й хромосом;
  • нарушения, связанные с 13-й хромосомой (у малыша диагностируется синдром Патау);
  • синдром Клайнфельтера;
  • синдром Шерешевского-Тернера;
  • отклонения в 22-й хромосоме (диагностирование у малыша синдрома «кошачьих зрачков»).

Предимплантационная генетическая диагностика также способствует выявлению:

  • почечного поликистоза;
  • торзионной дистонии;
  • анемии Фанкони;
  • фенилкетонурии;
  • миодистрофии;
  • пигментозного ретинита;
  • пузырчатки;
  • ретинобластомы;
  • ахондроплазии;
  • миопатии;
  • миодистрофии.

Генетический анализ эмбрионов при ЭКО : основные показания

Проведение предимплантационной генетической диагностики рекомендовано одиноким женщинам или семейным парам, у которых существуют медицинские показания для такой процедуры. Генетическое исследование эмбриона перед подсадкой в матку проводится в следующих случаях.

  1. Родители (либо один из них) являются пассивными или активными носителями наследственных болезней. В связи с этим появляется большой риск, что серьёзные генетические патологии (моногенные или связанные с перестройкой хромосом), передадутся плоду.
  2. Возраст родителей. Предимлантационную генетическую проверку зародышей нужно проводить обязательно, если будущей матери — более 35 лет, а будущему отцу — 39-40 лет. Чем старше пациенты клиник репродуктологии, тем выше у них риск зачать малыша, имеющего врождённые патологии, не связанные с носительством родителями мутационных генов.
  3. Резус-конфликт, приводящий к гибели плода.
  4. Наличие в яйцеклетках и спермиях хромосомных и генетических отклонений.
  5. Более 2-х безуспешных попыток ЭКО.
  6. Спермограмма будущего отца свидетельствует о наличии серьёзных проблем со здоровьем (азооспермия, олигозооспермия, большое количество дефектных спермиев в эякулятной жидкости).
  7. В анамнезе женщины присутствует более 2-х самопроизвольных абортов, которые произошли на ранних стадиях беременности.
  8. Если у родителей уже есть ребёнок, страдающий от тяжёлой патологии, и ему необходимы стволовые клетки, то рождение ещё одного малыша (который может стать донором) является острой необходимостью. Данная методика относится к системе HLA.

Проведение ПГД по медицинским показаниям перед искусственным оплодотворением в дальнейшем исключает необходимость пренатальной диагностики, увеличивающей риски преждевременного прерывания беременности.

Генетическое исследование перед ЭКО : преимущества и риски

Предимплантационная генетическая диагностика эмбрионов, стоимость которой довольно высока, обладает своими преимуществами и недостатками.

  • отобранные после диагностики эмбрионы полностью здоровы, поэтому в слизистую матки при проведении искусственного оплодотворения помещается качественный материал;
  • вероятность развития хромосомных аномалий у плода после ЭКО с ПГД минимальна, поэтому женщине не нужно будет делать аборт;
  • риски повреждения эмбриона при генетическом анализе минимальны и составляют меньше 1%;
  • генетический анализ ЭКО медицинские специалисты признали безвредным (процедура проводится, когда зародыш находится на раннем этапе развития, его клетки при делении могут взаимозаменяться и взятые для биопсии бластомеры быстро замещаются другими, здоровыми клеточками);
  • вероятность возникновения у плода врождённых пороков развития практически равна нулю;
  • повышается успешность терапии бесплодия;
  • исключается вероятность резус-конфликта у матери и плода;
  • определяется пол будущего малыша (эта информация актуальна для родителей, которые являются носителями наследственных болезней, связанных с полом);
  • подбирается зародыш, обладающий гистологической совместимостью и подходящий для донорства сестре или брату, страдающих тяжёлыми заболеваниями (например, онкологией).
Читайте также:  БПР плода по неделям беременности: норма бипариентального размера головы и других показателей на УЗИ

Отрицательные моменты генетической диагностики перед ЭКО:

  • преимплантационная генетическая диагностика, цена которой многим пациенткам кажется непомерно высокой, всё-таки имеет минимальные риски нарушения целостности зародыша в результате биопсии;
  • сохраняется вероятность появления ложных результатов генетического анализа, подсадки в матку эмбриона с плохой генетикой, ошибочного «отсеивания» здоровых зародышей (в связи с этим женщинам, которые уже забеременели после ЭКО , специалисты рекомендуют пройти дополнительную диагностическую проверку, взять для анализа ворсинки хориона, выполнить амниоцентез);
  • самое тщательное лабораторное исследование эмбрионов не даёт полной гарантии того, что все эмбрионы с дефектами и генетическими отклонениями будут исключены (метод характеризуется 95-97% достоверностью, однако остаётся риск беременности с наличием аномалий у плода);
  • генетическое исследование эмбрионов перед имплантацией в матку не даёт 100% гарантий того, что процедура ЭКО пройдёт успешно (согласно статистике, выполнение стандартных протоколов ЭКО проходит успешнее, нежели подсадка зародышей с их предварительным генетическим исследованием в лаборатории).

Предимплантационная генетическая диагностика и особенности её проведения

Выполнение ПГД предусматривает, что оба супруга пройдут исследование для выявления генетических дефектов. Если этот анализ покажет наличие мутаций неясного происхождения или не выявит характер генетических отклонений, то предварительное диагностирование перед ЭКО становится невозможным.

Проведение ПГД даёт возможность выполнения биопсии на разных этапах эмбрионального развития.

  1. Забор полярных телец из яйцеклетки или зиготы. Биоматериал позволяет исследовать только хромосомный набор матери будущего младенца. Метод высокоэффективен, если генетические отклонения в семье наследуются только женщинами. При помощи анализа определяется состояние здоровья яйцеклетки, причём она сама не подвержена повреждениям. Если генетические отклонения в яйцеклетке не обнаружены, её оплодотворяют, а потом вместе с эмбрионом подсаживают к женщине в матку.
  2. Взятие клеток на этапе их дробления (бластомеры, эмбрион, включающий в себя 6-10 клеток). Указанный период соответствует 3-му дню развития зародыша. Процедура биопсии здесь предусматривает анализ 1-2 бластомеров. Она проводится удалённо, а эмбрионы продолжают развиваться. Перенос в слизистую матки наиболее качественных зародышей происходит через 5 суток после оплодотворения.
  3. Забор клеток у зародыша, находящихся в стадии бластоцисты. Повторный анализ, который проводят в тех случаях, когда результаты исследования на стадии дробления оказались сомнительными.

Оптимальную схему предимплантационной генетической диагностики подбирает для пациенток специалист-генетик. Часто бывает так, что исследование полярных телец осуществляют в комплексе с анализом бластомеров. Это позволяет получить более точные результаты диагностики.

Стоимость предимплантационной генетической диагностики эмбриона

Какой бы дорогой не казалась предимплантационная генетическая диагностика, стоимость её по сравнению с лечением наследственных заболеваний во много раз меньше. Цена на процедуру формируется с учётом затрат на использование недешёвых материалов и современного диагностического оборудования. Берётся во внимание и квалификация медицинского персонала. В России за ПГД нужно заплатить около 100 000 рублей. Цена варьируется в разных пределах, от 35000-90000 до 130 000 рублей. На неё влияют такие факторы, как:

  • число исследуемых зародышей;
  • количество проверяемых хромосом;
  • необходимость исключить патологии, сцепленные с полом;
  • необходимо определить причины невынашивания беременности;
  • частичная или полная проверка эмбрионов.

В Украине сумма за предимплантационную диагностику эмбрионов колеблется в диапазоне 14000-44000 гривен. Диагностика дополнительных зародышей оплачивается отдельно и стоит около 7000 гривен.

ЭКО с ПГД по ОМС

Время чтения: мин.

ЭКО: генетическая диагностика

В настоящее время идет бурное развитие во всех сферах разнообразных инновационных технологий, технический и научный прогресс не прошел и мимо медицине. В сфере репродуктологии врачи добились колоссальных успехов. Сейчас обыденным являются различные методы вспомогательных репродуктивных технологий, хотя раньше человечество о таком и мечтать не могло. Одним из видов таких технологий является использование метода экстракорпорального оплодотворения. Это дает надежду всем бесплодным парам, которые уже испробовали все методы лечения и способы зачать ребенка, но которые были только пустой тратой времени. Протокол экстракорпорального оплодотворения имеет ряд довольно сложных медикаментозных схем и манипуляций, является трудоемким процессом, а так же сопровождается значительным психо-эмоциональным напряжением для женщины и семьи в целом. Не такой редкостью сейчас для врачей являются различные врожденные пороки развития плода, хромосомные аномалии. Которые выявляются на первом, на втором скринингах, а некоторые могут быть выявлены уже после рождения ребенка даже в случае самопроизвольно наступившей беременности. Поэтому одной из главных задач в современной репродуктологии является развитие отрасли выявления различных патологий развития эмбриона еще до стадии его переноса в полость материнской матки. С этой целью врачи-репродуктологи используют, так называемую, ЭКО с ПГД. ЭКО с ПГД в Москве доступно так же, как и в других крупных городах Российской Федерации.

Генетический анализ эмбриона пгд эко

Что это такое и в чем суть методики?

Однако, не всем и не всегда предлагается проведение предимплантационного исследования. Выделяют группу факторов, при наличии которых, протокол ЭКО подразумевает проведение такого исследования.

К ним относятся:

  1. Если, вступающая в протокол экстракорпорального оплодотворения, женщина достигла возрастной планки в 35 лет, то риски развития генетических аномалий повышаются в разы, в отличии от женщин, моложе этого возраста;
  2. По такой же причине исследованию подлежат эмбрионы, которые были получены путем оплодотворения сперматозоидами мужчины, возраст которого более 45 лет. С каждым годом риски повышаются;
  3. Наличие в анамнезе гибели плода по причине резуз-конфликтной беременности;
  4. Отягощенный наследственный анамнез хотя бы у одного супруга из пары. Так как высок риск наследственной передачи генов, кодирующих генетическое патологическое состояние.
  5. Наличие в репродуктивном анамнезе нескольких пролетных протоколов экстракорпорального оплодотворения;
  6. Отягощенный акушерский анамнез в виде самопроизвольных абортов. Замерших беременностей. Это объясняется тем, что такие патологические состояния беременности в сроке до 8 недель обусловлены в 80% генетическими и хромосомными аномалиями;
  7. В мужской сперме повышено содержание аномальных половых клеток – сперматозоидов.

Диагностика требует значительного число фолликулов. Поэтому при ПГД женщине делают повышенную стимуляцию яичников.

Чего же врачи-репродуктологи хотят добиться, используя столь сложную и трудоемкую методику:

  • Минимизировать риски рождения потомства с генетическими аномалиями;
  • По выявленному кариотипу определить пол будущего ребенка для исключения сцепленных с полом заболеваний;
  • Групповая и резус принадлежность ребенка позволит исключить риск гемолитических осложнений;

К ним относяться биохимический и ультразвуковой скрининг, которые рассчитывают риски рождения ребенка с патологиями развития. При выявлении высоких показателей пренатального скрининга. Женщина должна быть отправлена на инвазивные методы диагностики, такие как амниоцентез – забор околоплодной жидкости с целью получения материала для исследования кариотипа, кордоцентез – исследование пуповинной крови.

Плюсы и минусы ЭКО ПГД

Пренатальная генетическая диагностика имеет как положительные. Так и отрицательные стороны.

К положительным можно отнести:

  1. Проведение генетического исследования и с уверенностью в 95% перенести в полость матки при проведении протокола экстракорпорального оплодотворения здоровых, жизнеспособных эмбрионов.
  2. Возможность получения потомства такого пола, какого хотят родители.
  3. Положительным является возможность профилактировать резус-конфликты, а так же гемолитические осложнения этих патологических состояний.
  4. Предотвратить самопроизвольное прерывание беременности по причине хромосомный, генетических аномалий, которые в 80% прерываются в сроках до 8 недель.
  5. Из-за отсутствия осложнений, связанный с разнообразными генетическими аномалиями программа экстракорпорального оплодотворения в больших случаях заканчивается успехом.
  6. Врожденные пороки практически полностью исключаются.
  7. Еще один, немало важный момент, на который имеет огромное влияние получение данных предимплантационной диагностики – это психо-эмоциональный покой женщины. Бедующая мама, даже та, которая получила самопроизвольно наступившую беременность, в силу доступности разнообразной информации, переживает по поводу рождения ребенка с каким-либо пороком развития. Данные патологические состояния с каждым годом все больше и больше встречаются среди рожденных детишек в силу самых разнообразных причин. Поэтому мама, получившая ответ, который на 95% гарантирует ей рождение здорового ребенка, будет чувствовать себя спокойно, уверенно и ее психологический настрой не будет влиять на возникновение тонуса матки и, соответственно, снизиться риск самопроизвольных абортов, угроз прерывания беременности, угрозы преждевременных родов.

Однако, эта стоимость никогда не сравнится с ценой человеческой жизни. А особенно жизни еще нарождённого ребенка.

Методики ЭКО с ПГД – стоимость

Различают различные методики проведения предимплантационного генетического исследования. К ним относятся:

  • Метод исследования, кодированный аббревиатурой «FISH» – это метод флюоресцентной гибридизации, который подразумевает исследование молекулярно-генетического вида. Весь генетический материал находится в ядрах каждой клетки. Целесообразно проводить диагностики в определенные периоды деления клеток, а именно в интерфазу либо метафазу. Это наиболее доступный в финансовом плане метод, однако и информативность его наименьшая, так как он не дает возможности исследовать весь хромосомный набор, что является довольно отрицательной особенностью метода.
  • Методом. Который дает возможность исследовать весь хромосомный набор является CGH – метод сравнительной геномной гибридизации. Он позволяет выявить бластоцисты с высоким имплантационным потенциалом. Но есть у него и огромный недостаток – это его цена. Метод является дорогостоящим и не доступным для все семейных пар, вступающих в протокол экстракорпорального оплодотворения.
  • Метод ПЦР – полимеразной цепной реакции, так же осуществляет диагностику наследственных заболеваний, в результате мутаций.
  • Метод NGS – Now-Generation Sequencing, метод инновационный, который, вскоре, вытеснить все другие методики. Является высокоинформативным и репродуктологи на него возлагают немалые надежды.

Что же женщине придется пережить при проведении генетического исследования? Из каких этапов состоит методика данной диагностической манипуляции?

Сначала семейная пара должна быть консультирована генетиком для полноценного обследования, выявления показаний для предимплантационной диагностики. Далее протокол экстракорпорального оплодотворения проходит без каких-либо особенностей, которые бы затрагивали женщин.

Затем с отобранным материалом проводятся исследования любым методом из выше перечисленных. Эта стадия является одной из наиболее ответственных, так как от квалификации врача-репродуктолога, от его выбора зависит дальнейшая судьба беременности, еще нарождённого ребенка, матери, а так же все семьи.

После получения результатов, эмбрионы, не соответствующие требованиям отсеиваются, а переносу подвергаются только качественные, жизнеспособные эмбрионы. Подсадка выполняется на 5 день культивирования.

Предимплантационная генетическая диагностика не имеет каких-либо осложнений и частота возникновения неудачного протокола экстракорпорального оплодотворения без ПГТ не отливается от ЭКО с ПГД.

Этот метод является прекрасным способом снизить частоту вынашивания детей с врожденными аномалиями, однако, по определенным причинам, не всегда удается его провести в силу наличия противопоказаний к его применению.

  1. Исследуемый эмбрион не имеет шести бластомеров, что является недостаточным для проведения ПГД.
  2. У эмбриона диагностированы многоядерные бластомеры;

ЭКО генетическая диагностика – для чего она нужна

В целом, метод является прекрасной профилактикой врожденный пороков развития плода, повышает шансы успешного наступления беременности и дальнейшего вынашивания без угрозы прерывания, даже профилактирует развитие рез-конфликтов, что имеет огромное значение для резус-отрицательных женщин, для которых этот протокол эстракорпорального оплодотворения не является первым либо уже были беременности в анамнезе. Единственным, но очень существенным, минусов является цена процедуры. Не каждая бесплодная семейная пара может себе позволить даже саму процедуру экстракорпорального оплодотворения в силу финансовых трудностей, а уж тем более и дополнительные растраты на предимплантационную диагностику. Но в данный момент есть решение этому вопросу. Согласно Федеральной программе, подав заявку на сайт, семейные пары могут принять участие в программе бесплатного проведения протокола ЭКО с ПГД по ОМС, то есть ЭКО с ПГД стоимость оплаты за проведение данных манипуляций берет на себя фонд обязательного медицинского страхования. Данная программа дарит шанс на светлое будущее отчаявшимся семьям, у которых стоит такой страшный диагноз бесплодия. Не стоит отчаиваться, ведь самое большое счастье теперь стало так близко к Вам.

ПГД – все за и против для успешной беременности: предимплантационная генетическая диагностика эмбрионов

Стоит ли делать ПГД для повышения шансов успешного наступления беременности? Решение о проведении предимплантационной генетической диагностики вызывает массу споров на форумах будущих ЭКО-мам. Актуальность вопроса остается на пике, тем более что стоимость ПГД при ЭКО увеличивается. Так влияет ли анализ на вероятность наступления беременности?

Содержание

  • Цели и преимущества анализа
  • Зачем делать ПГД при ЭКО?
  • Показания к проведению
  • Проводить диагностику или нет?
  • Как часто встречаются генетические отклонения у эмбрионов?
  • Как проводится исследование?
  • Этапы
  • На какой день лучше провести ПГД на 3 или на 5?
  • Отмена переноса после диагностики
  • Подготовка к программе
  • Что нужно сделать при наступлении беременности?
  • Стандартные наборы для диагностики

Цели и преимущества анализа ПГД

Предимплантационная генетическая диагностика ПГД при ЭКО – это метод исследования генома до переноса эмбриона в полость матки. Главная цель – выбор эмбриона для подсадки без генетических патологий, носителями которых являются родители.

Для успешной беременности важно перенести не просто качественный, но и «здоровый» в генетическом плане зародыш. Основное преимущество ПГД – это снижение риска прерывания беременности, как самопроизвольных абортов, так и искусственного прерывания в случае выявления патологии на перинатальном этапе (т. е, когда беременность уже наступила).

Зачем делать анализ?

Положительный эффект от ПГД достаточно весом. Зачем же рекомендуют проведение анализа репродуктологи? Анализ важен, так как он:

  • увеличивает процент имплантации;
  • снижает уровень самопроизвольных абортов;
  • снижает уровень рождаемости детей с генетическими отклонениями (наиболее часто встречаемая патология – рождение ребенка с синдромом Дауна);
  • дает возможность выбора одного, но самого лучшего эмбриона для трансфера в матку (позволяет избежать многоплодной беременности);
  • способствует рождению здорового доношенного ребенка в срок;
  • позволяет выбрать пол ребенка, что необходимо для предупреждения генетических отклонений, сцепленных с полом.

Недостаток ПГД – стоимость программы ВРТ повышается.

Показания к проведению ПГД при ЭКО

Проведение ПГД показано:

  • супружеским парам с высоким генетическим риском (семейные случаи генетических заболеваний);
  • женщинам старше 35 лет. С возрастом количество генетически аномальных эмбрионов значительно возрастает, а доля нормальных снижается.
  • семейным парам, у которых возраст партнера превышает 45 лет;
  • в случае если мужчина имеет тяжелые нарушения сперматогенеза, высокий процент аномальных сперматозоидов, или единичные половые клетки.
  • женщинам с привычным невынашиванием, особенно на ранних сроках беременности от 4 до 8 недель.
  • парам после многократных неудачных попыток ЭКО.

Проводить анализ ПГД или нет?

Проведение ПГД актуально также для пар, которым переносили эмбрионы хорошего и отличного качества, но беременность не наступила. Одна из возможных причин – генетическое нарушение.

Эмбрион нормального качества может быть с нарушенным генотипом. Хорошее качество переносимой единицы – это не всегда качественный генотип.

Поэтому ПГД при ЭКО – это всегда вторая ступень отбора эмбрионов для переноса в полость матки. Первая ступень – продленная культивация до стадии бластоцисты. Первые три дня развитие зародыша происходит на материнских запасах. На 4 день включается в работу собственный геном. Грубые нарушения генетической информации в клетках блокируют дальнейшее развитие.

Как часто встречаются генетические отклонения у эмбрионов?

У эмбрионов отличного и хорошего качества достаточно большой процент изменений кариотипа (анеуплоидий), которые не позволяют нормально развиваться в дальнейшем. С данными в цифрах можно ознакомиться в таблице 1.

Таблица 1. Качество бластоцист и качество генетического набора хромосом

Качество бластоцистыОтличноеХорошееУдовлетворительноеНеудовлетворительное
Процент эмбрионов с правильным набором хромосом (здоровых)56,4%42,8%39,125,5
Частота анеуплоидий (аномальный набор хромосом)43,6%57,2%60,9%74,5%

Можно сделать вывод, что в 25–39% случаев беременность могут дать эмбрионы удовлетворительного и неудовлетворительного качества, так как они генетически полностью «здоровы». Но для того чтобы их выявить, нужен анализ ПГД. Проведение диагностики на таких эмбрионах крайне затруднительно. Клеточного материала слишком мало и его достаточно трудно получить без ущерба для развивающегося организма. Риск остановки развития эмбрионов удовлетворительного и неудовлетворительного качества после биопсии очень высок. Чаще всего их не подвергают исследованию.

Метод ПГД – как проводится исследование?

В мире существует 4 метода проведения ПГД, для которых необходимо разное оснащение генетической лаборатории:

  • Флуоресцентная гибридизация in situ – FISH. Наиболее доступный и чаще всего используемый метод в странах СНГ. По сравнению с другими он недорогой, требует немного времени – всего 4–5 часов. Его недостаток – он не позволяет исследовать все хромосомы.
  • Сравнительная геномная гибридизация (CGH). Метод позволяет исследовать все хромосомы, достаточно дорогой, требует значительных временных затрат. При его использовании бластоцисты замораживают и перенос осуществляют в криопротоколе.
  • Полимеразная цепная реакция (PCR). Позволяет исследовать моногенные хромосомные мутации и требует предварительной диагностики родителей. Вначале проводится обследование супружеской пары, выявляется наличие мутации (определяется в каком гене). И только после того, как ее выявили у родителей, мутацию ищут у эмбриона.

  • Now-Generation Sequencing – метод ПГД, позволяющий исследовать все хромосомы и полиморфизмы (полный геномный анализ), очень дорогой. На сегодняшний день – это одна из высокоразрешающих технологий, которая позволяет исследовать не только хромосомный набор, но и мутации в любом из участков хромосом.

Этапы проведения ПГД

Исследуют генотип у трехдневных и пятидневных эмбрионов. В последнее время тенденция идет к тому, что анализ чаще выполняют 5-дневкам. Причина – возможность более точного анализа по результатам исследования не одной клетки, а нескольких. Для ПГД эмбриона третьего дня культивации берут 1 (максимум 2) бластомер. При анализе бластоцист делают забор 5–7 клеток из трофэктодермы (участок эмбриональной ткани, из которой развивается плацента). Клетки, из которых развиваются собственно органы и ткани ребенка в исследовании не участвуют.

Этапы проведения ПГД:

  1. Биопсия эмбриона.
  2. Фиксация ядер клеток на слайде (предметное стекло для работы под микроскопом).
  3. Гибридизация ДНК-зондами. Зонд – это метка, каждой хромосоме соответствует своя метка, которая отличается цветом флуоресцентного свечения. Каждая пара хромосом светится определенным цветом, что позволяет их идентифицировать.
  4. Визуализация на мониторе компьютера флуоресцентного микроскопа и интерпретация полученной информации. В каждом ядре подсчитывается количество хромосом. Если количество хромосом нормальное, то такую бластоцисту рекомендуют к переносу. Если выявляется трисомия (три хромосомы вместо двух) или моносомия (одна хромосома вместо двух) – эмбрион не рекомендован к переносу. Он аномальный.

На какой день лучше провести ПГД на 3 или на 5?

Последние исследования показали, что биопсия эмбрионов для ПГД на третьи сутки дает высокий риск остановки развития. Плюс к этому у зародыша на 3 сутки высокий уровень мозаицизма (клетки генетически отличаются), что влечет появление ложных результатов и повышает процент ошибки.

Широко используется ПГД эмбриона на 5 сутки, поскольку биопсия для него менее травматична, а материала для исследования больше.

Другие преимущества ПГД для удачного ЭКО:

  • бластоцисты легче переносят биопсию;
  • выше частота наступления беременности;
  • низкий риск остановки развития.

Существует понятие «полная бластоциста» – это когда произошла полная дифференциация клеток эмбриона и под микроскопом четко видна внутриклеточная масса и трофэктодерма. Именно таким бластоцистам делают предимпланационную генетическую диагностику.

Существует понятие «ранней бластоцисты». У них дифференцировка еще не завершилась. Такие эмбрионы не подвергают биопсии, а продолжают культивацию до 6 суток и после завершения дифференцировки делают ПГД.

Отмена переноса после ПГД

Процент отмены подсадки эмбрионов после ПГД достаточно высок, и его уровень растет вместе с возрастом женщины. Часто бывает, что после исследования нет эмбриона, пригодного для переноса. У женщин старше 40 лет процент выбраковки эмбрионов составляет 25%.

У одной из четырех женщин после обследования ПГД качественных эмбрионов в генетическом отношении нет вовсе, и перенос не проводится.

Риски ПГД

Обследование инвазивное, поэтому существуют риски для самого зародыша и риски недостоверности полученных данных обследования:

  • риск повреждения эмбриона при биопсии, особенно это касается 3 дневных эмбрионов;
  • риск биологической ошибки при высоком уровне мозаицизма;
  • риск нарушения работы оборудования или недостаточная квалификация доктора.

Подготовка к программе ЭКО с ПГД

Перед программой ЭКО с ПГД обязательно проводится консультация врача-генетика.

Подготовка к ЭКО + ПГД включает:

  • обследование пары (кариотипирование, выявление мутаций, перестроек);
  • определение показаний к ПГД;
  • разъяснений сути программы, возможных рисков и ошибок, точности метода.

Также важно оговорить с доктором тактику поведения в случае малого количества эмбрионов (на одном эмбрионе не целесообразно проводить ПГД). А также действия при отсутствии эмбрионов на перенос по данным генетического исследования.

При наступлении беременности после удачного ЭКО с ПГД

С успешным наступлением беременности после ЭКО с ПГД женщину ожидает тщательное наблюдение с проведением ультразвукового скрининга, перинатального скрининга в первом и втором триместре, как при естественной беременности.

При выявлении патологии или отклонений от нормы принимается решение о необходимости инвазивной перинатальной диагностики. Это довольно сложная процедура, приравнивается к операции и проводится в стерильных условиях. Ее цель – получить биопсийный материал – ворсинки хориона, плаценту или околоплодные воды для анализа. Полученные образцы исследуют и ставят диагноз.

В случае спонтанного прерывания беременности проводится генетическое обследование абортивного материала.

Стандартные наборы для диагностики

Для исследования широко используются стандартные наборы. С их помощью можно диагностировать нарушения в 3 хромосомах (X, Y и 21 пара), в 9 (13, 18, 21, 15, 16, 17, 22, X, Y) или можно исследовать 24 хромосомы. При необходимости клиника заказывает индивидуальный набор для ПГД диагностики компании производителю.

Актуальное видео

Преимплантационная диагностика


Что такое предимплантационная диагностика при ЭКО и что она показывает?

Женщины, которые идут на ЭКО, не всегда хорошо представляют себе основные этапы этой методики. А когда врач интересуется, хотели бы пациенты сделать предимплантационную диагностику, вопросов становится еще больше. Некоторые отказываются, узнав, что ПГД приводит к удорожанию протокола, другие просто не знают, с какой целью назначается такое генетическое исследование и нужно ли оно вообще. В этой статье мы расскажем, что собой представляет ПГД при ЭКО и о чем оно может рассказать.

ПГД – что это такое?

С момента слияния яйцеклетки женщины со сперматозоидом мужчины на генетическом уровне предрешено все – цвет волос будущего ребенка и его рост, интеллектуальные способности и половая принадлежность, а также возможные генетические аномалии и заболевания, которые ребенку достались по наследству от родителей, бабушек-дедушек или других родственников.

Предимплантационная диагностика – это комплекс геномных исследований, который позволяет выявить у эмбриона, которому всего несколько суток, различные отклонения в развитии, болезни, синдромы и прочие неприятности. ПГД способна выявить около 150 наследственных генетических недугов, среди которых и достаточно распространенные – синдром Дауна, Тернера, и достаточно редкие – муковисцидоз, гемофилия, синдром «крыла бабочки» и др.

При помощи специальных методик и высокоточного оборудования больные эмбрионы определяются и отсеиваются. Для пересадки в полость матки женщины используют только качественные, здоровые и жизнеспособные зародыши.

Стандартное ЭКО не включает обязательного этапа предимплантационной диагностики. После оплодотворения и культивирования зародышей в течение нескольких суток оцениваются только темпы роста, скорость дробления, жизнеспособность эмбрионов. После этого проходит перенос их в полость матки женщины. Какие из них приживутся и приживутся ли вообще – большой вопрос. Эффективность стандартного ЭКО – около 35%.

Если проводится предимплантационная диагностика, то будущие родители могут не переживать за состояние здоровья малыша, даже если у них самих имеются определенные генетические проблемы. К тому же эффективность ЭКО с ПГД несколько выше – около 40-45%. Это связано с тем, что большой эмбрион, даже имплантировавшись в матку, имеет крайне мало шансов на развитие и выживание. Здоровый и обследованный зародыш более вероятно успешно закрепится и начнет расти и развиваться.

Цель обследования

ПГД настоятельно рекомендуется родителям, у которых есть генетические заболевания, которые могут быть унаследованы малышом. Также такая предварительная генетическая экспертиза эмбрионов не помешает, если в рядах близких родственников будущих родителей были наследственные недуги.

Диагностика перед имплантацией важна и необходима парам, в которых кто-то из родителей является носителем заболевания, сцепленного с половой хромосомой. Например, женщина носит ген гемофилии, но больным ребенок будет только в том случае, если это будет малыш мужского пола. ПГД в этом случае определяет пол эмбрионов, которым всего несколько дней, и врачи отбирают для подсадки только тех зародышей, которым гемофилия не угрожает, то есть девочек.

Женщине с отрицательным резус-фактором и несколькими беременностями в прошлом (не имеет значения, чем они закончились), рекомендуется ПГД, если для экстракорпорального оплодотворения использовалась сперма мужа с положительным резус-фактором. В этом случае врачи отберут из всех получившихся зародышей только тех, кто унаследовал материнскую резус-принадлежность. В этом случае беременность после ЭКО протекать будет с меньшими рисками, и малышу не будет угрожать опасная гемолитическая болезнь.

ПГД рекомендуется паре в том случае, если у женщины было два и более выкидыша ранее, если имели место быть случаи замершей беременности, а также в том случае, если у любого из супругов в первом браке или у них совместно уже рождался ребенок с хромосомными аномалиями или генетическими патологиями. Диагностика до переноса позволяет исключить из числа рассматриваемых к пересадке зародышей тех, кто болен или имеет аномалии негенетического происхождения.

Предимплантационная диагностика во втором или третьем по счету протоколе ЭКО позволяет с высокой точностью установить причины неудачных предыдущих попыток.

И совсем нестандартная, но, увы, реальная ситуация – родители идут на ЭКО, чтобы родить малыша, который сможет стать донором, например, костного мозга, для собственного старшего братика или сестры. В этом случае полагаться за естественное зачатие слишком рискованно. Родившийся ребенок может не подойти в качестве донора для больного родственника.

Предимплантационная диагностика поможет отобрать из получившихся эмбрионов особи с определенным сочетанием генетической информации, гарантирующей геномное совпадение между детьми. Это исследование называется HLA-типирование.

Что показывает обследование?

Предимплантационная генетическая диагностика позволяет заранее выявить различные заболевания и состояния, при которых ребенок может быть нежизнеспособным или инвалидом. Все зависит от того, какие рекомендации дает врач-генетик. При необходимости эмбрионы обследуют лишь на определенные критерии и мутации генов, в целом же существует возможность оценки всех параметров, определяемых при помощи исследования.

Так, ПГД с точностью до 97-99% определяет слепоту и глухоту, врожденную глухонемоту, ретинобластому, анемию Фанкони, нейрофиброматоз, фенилкетонурию, миопатию, торсионную дистонию, мышечную дистрофию Дюшена и еще несколько десятков опасных и неизлечимых заболеваний и синдромов.

Также ПГД определяет кариотип зародыша, его группу крови и резус-фактор, половую принадлежность, наличие мутаций на генном уровне, несвойственных родителям и проявившихся впервые.

Кому назначают?

Поскольку предимплантационная диагностика сама по себе – удовольствие недешевое. Далеко не каждой женщине, отважившейся на экстракорпоральное оплодотворение, этот дополнительный этап рекомендуется. Предлагают его всем, но есть категории пациентов, которым крайне нежелательно отказываться от предварительной генетической оценки эмбрионов до переноса в матку.

К таким пациентам относятся:

  • «Возрастные» женщины и семейные пары. С возрастом стареют и теряют здоровье половые клетки мужчины и женщины. Под действием лекарственных препаратов, вредных привычек, неблагоприятной экологии и просто прожитых лет может мутировать их ДНК-набор. Поэтому у «возрастных» женщин и мужчин выше риски хромосомных аномалий плода. ПГД настоятельно рекомендуется женщинам после 35 лет, а также парам, в которых мужчине более 40 лет.
  • Резус-отрицательные женщины, у которых были аборты, выкидыши, роды, рождались дети с гемолитической болезнью. Диагностика актуальна только в том случае, если супруг имеет положительный резус-фактор крови. Если применяется донорская сперма, то изначально выбирается биоматериал мужчины с отрицательным резус-фактором, тогда вероятность получения резус-положительных зародышей – нулевая.
  • Женщины, которые уже имеют опыт 1-2 неуспешных попыток ЭКО при отсутствии объективных причин (протоколы проведены правильно и без осложнений, отсутствуют эндометриоз и другие преграды для имплантации).
  • Если для оплодотворения использована сперма мужчины с низкими качественными показателями спермограммы (тератозооспермия, азооспермия, астенозооспермия). При естественном зачатии сперматозоиды низкого качества гибнут, не имеют шансов на оплодотворение, при ЭКО они вполне могут оплодотворить яйцеклетку, ведь естественный отбор нарушен, что может привести к развитию у плода различных патологий.

Виды диагностики

Существует несколько разновидностей генетической диагностики эмбрионов. Они отличаются сроками проведения исследования, техническими нюансами, оборудованием и способами исследования. Перечислим основные, не углубляясь в лабораторные и генетические подробности:

  • FISH – это метод флуоресцентной гибридизации. Это довольно стандартное исследование, стоимость которого невысока по сравнению с другими способами предимплантационной диагностики. Но и точность его несколько ниже, чем у других методов. Этот способ широко применяется в клиниках России, Украины и Беларуси. Зарубежные клиники от него практически отказались в силу того, что появились более точные исследования. Плюс в том, что исследование проходит быстро – в течение нескольких часов. Минус – в том, что многие хромосомы даже не исследуются.
  • CGH – метод сравнительно геномной гибридизации. Очень затратный способ. Причем как в финансовом отношении, так и во временном. Зато перечень определяемых патологий больше, чем у вышеописанного способа, а точность неизмеримо выше. Помимо прочего, такой способ диагностики до подсадки позволяет определить, какие эмбрионы обладают более высокими шансами на имплантацию.
  • ПЦР – метод полимеразно-цепной реакции. Выявляет резус-принадлежность эмбриона, группу его крови, а также довольно большой перечень генетических проблем. Исследование требует обязательного предварительного обследования биологических родителей на генетические мутации. Если женщине подсаживают донорский эмбрион или для оплодотворения брали донорские ооциты, метод ПЦР не может применяться.
  • NGS – метод секвенирования. Это современный способ проведения предимплантационной диагностики, который объединил в себе лучшее от всех перечисленных выше. Он дает наиболее полную картину состояния здоровья эмбрионов, правда, и стоимость его выше, чем у остальных методов.

Как проходит исследование?

Для того чтобы у эмбриологов и генетиков была возможность сделать ПГД, должно быть получено достаточное количество яйцеклеток посредством предварительной гормональной стимуляции. Если из менее 3-4, то предимплантационная диагностика обычно не проводится. После того как врачи «организуют» встречу яйцеклеток с очищенными сперматозоидами, в течение 2-5 суток отслеживается развитие эмбрионов. Потом эмбриолог может отобрать самые жизнеспособные. На пятые сутки бластоцисты уже имеют порядка 200 клеток. Появляется возможность без ущерба для зародыша взять около 5-7 клеток у каждого зародыша на генетическое исследование.

Для забора клеточек используются современные высокоточные лазеры, проводится биопсия клеточных оболочек, применяются и другие методы. Обследование цепочки ДНК дает исчерпывающую информацию о том, здоров ли эмбрион. После чего его рекомендуют к переносу.

Сам эмбриоперенос в случае согласия пары на предварительную генетическую диагностику зародышей может быть отложен. Если при стандартном протоколе ЭКО он осуществляется на 2, 3 или 5 день с момента оплодотворения, то результатов ПГД можно ждать от нескольких часов до 5-6 дней. Таким образом, цикл ЭКО продлевается как минимум на неделю. Стоимость протокола может увеличиться в случае согласия на предварительную диагностику эмбрионов на 40-240 тысяч рублей.

Все зависит от того, сколько эмбрионов планируется обследовать, каким методом из вышеперечисленных будет проходить обследование.

Чтобы снизить затраты, пара может воспользоваться средствами квоты, диагностика входит в перечень услуг, которые могут быть оказаны по ОМС, но в каждой клинике следует уточнять этот вопрос отдельно. Одни делают ПГД за счет средств бюджета, другие – нет.

Возможные осложнения

Как уже говорилось, материал для исследования генетики получают методом биопсии. Несмотря на ультрасовременное точное оборудование, сохраняется вероятность травмирования зародыша во время этой процедуры. Наиболее часто травмированию подвержены «трехдневки». Следует отметить, что вероятность травмирования довольно низка – около 3%, а пользы от исследования будет значительно больше. В остальном осложнения при таком ЭКО могут быть такими же, как и при ЭКО в стандартном протоколе.

Любой из этапов экстракорпорального оплодотворения может быть связан с определенными рисками, и от этого никуда не уйти. Важно, что все риски невысоки.

Паре нужно хорошо понимать, что даже современные и точные приборы, с которыми работают врачи высшей квалификационной категории, не гарантируют на 100% того, что малыш будет здоров. Так, при обширном мозаицизме могут возникнуть биологические ошибки, и женщине может быть подсажен больной эмбрион. Такая вероятность есть, но она очень мала – не более 0,05%.

Отзывы

По официальной информации Всемирной организации здравоохранения, ЭКО с ПГД увеличивает шанс успешности протокола примерно на 7-10% относительно базовых 35%. Однако положительных отзывов в российском сегменте интернета о предимплантационной диагностике не так много.

Некоторые женщины отмечают, что приживаемость эмбрионов, у которых забирали клетки на анализ, несколько хуже, а потому довольно много отзывов о неудачных протоколах ЭКО с предварительной генетической диагностикой плода. Это народное мнение медицина не подтверждает, и официальные цифры статистики не говорят о сниженном проценте успешной имплантации после обследования зародышей.

Часто женщины задают вопрос, можно ли сделать ПГД, чтобы выбрать пол малыша, ведь помимо того, что очень хочется детей, еще хочется либо сына, либо дочку. Техническая возможность определить пол есть, но отсеивать эмбрионы «ненужного» пола ни один врач не станет, если на то нет конкретного указания генетика (при болезнях, сцепленных с половой хромосомой). Дискриминация эмбрионов по половому признаку в России законодательно запрещена.

По отзывам, сам процесс диагностики, который может длиться несколько дней, доставляет немало переживаний женщине, ведь она до последнего не знает, сколько качественных эмбрионов получилось и получились ли они вообще. Помимо того, ей нужно поддерживать состояние эндометрия в нужной форме -принимать назначенные лекарства, сдавать кровь на прогестерон, делать несколько УЗИ, чтобы определить толщину функционального слоя матки. Это важно, чтобы перенос прошел максимально успешно и плодное яйцо смогло имлантироваться.

Случается, что пока идет диагностика, «удачное» для переноса время проходит. В этом случае протокол может быть прерван, а эмбрионы, прошедшие проверку, заморожены и отправлены в криобанк. Переносить их будут уже в следующем протоколе.

О тонкостях преимплантационной генетической диагностики смотрите в следующем видео.

медицинский обозреватель, специалист по психосоматике, мама 4х детей

Кому и зачем назначают ПГД при ЭКО

Предимплантационную генетическую диагностику иногда используют при экстракорпорального оплодотворения и после искусственной инъекции сперматозоида в яйцеклетку. Такая процедура показана, если есть риск передачи наследственных генетических патологий от родителей малышу. ПГД при ЭКО позволяет выявить более 150 хромосомных аномалий еще до внедрения яйцеклетки в маточную полость женщины. Поэтому риск рождения больного ребенка после процедуры сведено к минимуму.

Что такое ПГД

Хромосомный набор яйцеклетки или зародыша изучается в лабораторных условиях. Учитывая ранние сроки развития эмбриона, риск его травмирования сводится к 1%. Процедура назначается параллельно с основным лечением, предусмотренным протоколом. Однако для нее потребуется больше фолликулов, поэтому гормональная стимуляция яичников проводится в более интенсивном режиме.

Не все хромосомные мутации у родителей представляют опасность для здоровья их малыша. Развитие патологии напрямую зависит от признаков и комбинации генов у мамы и папы.

Различают два вида мутационных признаков: доминантный и рецессивный. Передача малышу доминантного мутирующего гена увеличивает риск патологии у ребенка на 50%. Если родители — носители рецессивного признака, то генетическая болезнь появится, когда малышу передадутся оба «больных» гена мамы и папы.

К тому же некоторые генетические патологии связаны с полом. Так, женская двадцать третья хромосомная пара выглядит как XX, мужская – как XY. Поэтому нарушения в одной хромосоме женщин не вызовет болезнь, так как вторая заблокирует ее действие. Здоровый рожденный ребенок продолжит «носительство» дефектной хромосомы.

У мужчин нет такой защиты, поэтому от них мальчики родятся с генетической патологией, а девочки в половине случаев станут носительницами «бракованной» хромосомы.

С помощью предимплантационной генетической диагностики эмбрионов генетики устанавливают конкретную комбинацию, которую унаследовал эмбрион. Полученная информация позволяет выявить, родится ли ребенок с патологией или только станет носителем хромосомного дефекта. Исследованию подлежат все полученные эмбрионы, из которых отбирают самые «чистые».

Этот анализ нельзя путать с предимплантационным генетическим скринингом. Отличие ПГД от ПГС существенное. ПГД проводят, чтобы выявить неизлечимые генетические патологии и минимизировать риски рождения больного ребенка. ПГС – исследования, позволяющие определить то число хромосом, анеуплоидии которых совместимы с рождением и внутриутробным развитием зародыша. Проще говоря, задача ПГС – увеличить шансы наступления беременности посредством отбора здоровых эмбрионов. У родителей, которым назначается ПГС, нет патологий наследственного типа, однако существует риск их появления.

Итак, процедура экстракорпорального оплодотворения проводится совместно с ПГД для таких целей:

  • «Не допустить» к подсадке эмбрионы, у которых выявлены дефектные гены;
  • Выяснить причины, по которым предыдущие протоколы ЭКО закончились безрезультативно;
  • Снизить риск рождения малыша с патологией от родителей-носителей;
  • Определить пол малыша, исключив хромосомные аномалии по половой принадлежности;
  • Выявить эмбрионы, у которых есть предрасположенность к патологиям генетического типа;
  • «Найти» зародыш, оптимальный по HLA-системе с другими детьми из семьи, который сможет стать донором при их лечении;
  • Снизить вероятность прерывания беременности на ранних сроках;
  • Уменьшить возможность появления гемолитического заболевания;
  • Выбрать один «идеальный» эмбрион, устранив возможность развития многоплодной беременности.

Генетическая диагностика позволяет выявить и исключить такие опасные патологии:

  • Болезни Тея-Сакса;
  • Серповидно-клеточную анемию;
  • Болезнь Гоше;
  • Болезнь Верднига-Гоффмана;
  • Ретинобластому;
  • Хорей Хантингтона;
  • Синдром Дауна;
  • Нейрофиброматоз;
  • Гемофилию;
  • Миопатию;
  • Ахондроплазию;
  • Фенилкетонурию;
  • Синдром Альперса;
  • Поликистоз почек;
  • Мышечную дистрофию Дюшена;
  • Пигментозный ретинит;
  • Болезнь Геттингтона;
  • Миодистрофию Дюшена;
  • Муковисцидоз;
  • Анемию Фанкони;
  • Глухонемоту;
  • Торсионную дистонию;
  • Пузырчатку;
  • Синдром Эдвардса.

Этот список не исчерпывается представленными патологиями: их более 150 видов.

Отметим, что зафиксированы случаи ложноотрицательных результатов. Дело в том, что некоторые методы исследования диагностируют только определенное количество хромосом. «Неучтенные» гены могут оказаться дефектными.

Иногда происходит мозаичное развитие мутаций. Во время исследования клетка диагностируется как здоровая, а мутация происходит в процессе ее развития.

В каких случаях необходима ПГД

Мы уже говорили о том, что ПГД делают не всем пациентам, обратившимся за помощью к экстракорпоральному оплодотворению. Существуют определенные показания к процедуре:

  • Родители являются носителями хромосомных дефектов, поэтому риск передачи малышу генетических аномалий очень высок. «Носительство» предусматривает наличие хромосомной перестройки или моногенных заболеваний.
  • Возрастная категория родителей: матери старше 36 лет, отцы, чей возраст превысил 40 лет. Чем старше супруги, тем больше риски развития генных мутаций, даже если будущие родители имеют «правильный» набор хромосом.
  • После предыдущих беременностей рождались дети, умершие от резус-конфликта.
  • В яйцеклетках и сперматозоидах выявлены дефектные гены и хромосомы.
  • Спермограмма определила серьезные отклонения от нормы у мужчины (такие патологии как азооспермия или олигозооспермия);
  • Предыдущие попытки забеременеть с помощью ЭКО оказались безрезультативными;
  • Возникающие беременности заканчиваются выкидышами на ранних стадиях развития эмбриона;

Учитывая внушительный список генетических заболеваний, ПГД при ЭКО делают всем женщинам, возраст которых перешагнул тридцатипятилетний рубеж. Это связано с возрастными изменениями, которые могут принести неприятные «сюрпризы» даже при естественной беременности. Старение яйцеклеток ускоряется и усугубляется такими факторами:

  • Длительная терапия сильнодействующими медикаментами;
  • Образ жизни в прошлом, связанный с потреблением алкоголя, никотина, наркотических средств;
  • Хронические патологии;
  • Опасные для здоровья условия профессиональной деятельности;
  • Плохая экология.

Генетическая диагностика показана и в таких случаях:

  • Рождение малыша связано с получением нужных стволовых клеток, совместимых по системе HLA, чтобы вылечить старшего ребенка;
  • Несовместимость резус-фактора;
  • Супруги являются близкими родственниками;
  • Пара находилась под воздействием радиационного излучения.

ЭКО с ПГД существенно увеличивает стоимость протокола. Поэтому женщина самостоятельно принимает решение о необходимости проведения исследования. Напомним, что экстракорпоральное оплодотворение лишь в 20-40 % случаев заканчивается беременностью. А генетическая диагностика не только выявит возможные генные мутации, но и значительно повысит шансы на благополучное зачатие.

Подготовка и проведение ПГД при ЭКО

Подготовка к предимплантационной генетической диагностике эмбрионов включает консультацию и полное обследование семейной пары с соответствующими показаниями. Доктор детально рассказывает о плюсах и минусах процедуры. Женщине поясняется, что генетическая диагностика требует большего количества зрелых яйцеклеток. Следовательно, гормональная стимуляция яичников будет проводиться интенсивнее, что увеличивает риск гиперстимуляции при ЭКО. После всех диагностических мероприятий приступают к процедуре ПГД.

Она состоит из семи этапов:

  1. Извлечение яйцеклеток и их оплодотворение в лабораторных условиях;
  2. Эмбриональное развитие, которое длится 3-5 суток;
  3. Отбор «лучших», самых жизнеспособных зародышей;
  4. Извлечение клеток из эмбриона для проведения биопсии;
  5. Фиксирование бластомер;
  6. Проведение гибридизации;
  7. Расшифровка полученных сведений.

Еще раз напомним, что исследование никак не отразится на здоровье эмбриона: органы и ткани будущего ребенка «не принимают участия» в процедуре.

После расшифровки генетик разделяет пригодные и «бракованные» зародыши. Если выявлено 2 хромосомы, которые соответствуют нормам, то такие зародыши подлежат подсадке. Развивающиеся яйцеклетки с выявленными нарушениями имплантировать нельзя.

Методы ПГД

Современная репродуктивная технология выполняет ПГД эмбриона 4 методами:

Рассмотрим специфику проведения каждой методики.

Молекулярно-цитогентический метод – второе название методики. Она широко применяется на постсоветском пространстве, имеет самую демократическую стоимость. Существенным недостатком fluorescence in situ hybridization (fish) является неточность диагностики, ведь этот метод исследует только часть хромосом.

Для проведения ПГД методом fish понадобится 5 часов. За это время генетик определит следующие важные факторы:

  • Последовательность хромосом;
  • Пол ребенка;
  • Наличие самых распространенных генетических аномалий.

Метод называют сравнительной геномной гибридизацией. Для него потребуется значительно больше времени и стоит он дороже. Однако методика имеет ряд важных достоинств, отличающих ее от других видов исследования:

  • «Находит» самые жизнеспособные зародыши, имеющие лучший потенциал к имплантации;
  • Проверяет много стволовых клеток, что существенно снижает риски постановки неправильного диагноза;
  • Диагностические мероприятия проводятся с замороженными яйцеклетками, которые перенесут в криопротоколе.

Методом ПЦР называют полимерную цепную реакцию. Она способна «найти» не только дефекты в функционировании хромосом, но и моногенныхе патологии. С помощью ПЦР определяются антитела родительской несовместимости и резус-фактор зародышей.

Важное условие перед проведением исследования – обязательная диагностика родителей на наличие генных мутаций. Такое исследование исключит ошибки при постановке диагноза патологии, возникающей из-за мутирования клеток.

Проведение ЭКО с использованием донорской яйцеклетки не предусматривает исследование методом ПЦР.

Высокопроизводительным секвенированием называют самый современный диагностический метод ПГД. Now-Generation Sequencing – самая дорогая и эффективная генетическая диагностика, позволяющая исследовать все 23 пары хромосом. Проводится весь геномный анализ, так как во время исследования рассматривается правильность последовательности ДНК.

Стоимость генетической диагностики

ЭКО требует серьезных трат. Генетическая диагностика увеличивает цену в разы, так как оборудование и материалы для процедуры очень дорогие.

Дать однозначный ответ, сколько стоит ПГД, нельзя, так как цена исследования зависит от нескольких факторов:

  • Метода диагностики;
  • Количества исследованных эмбрионов;
  • Использование дополнительных тестов;
  • Исследование транслокаций хромосом.

Цена диагностики зависит и от количества исследуемых аномалий.

В Москве стоимость ПГД одного эмбриона — от 25 000 до 30 000 рублей. За комплексное обследование нужно заплатить от 100 000 до 250 000 рублей.

Читайте также:  ХГЧ по неделям беременности: норма по дням от зачатия и расшифровка результатов
Добавить комментарий